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免疫组织化学染色方法
2016年03月10日
来源：生物帮
作者：生物帮
责任编辑：wlladmin
摘要：免疫组织化学染色
(1) 石蜡切片脱蜡至水。
(2) 3%H2O2室温孵育5~10分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。
(3) 蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟，(如需采用抗原修复，可在此步后进行)。
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(4) 5~10%正常山羊血清(PBS 稀释)封闭，室温孵育10分钟。倾去血清，勿洗，滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液，37℃孵育1~2小时或4℃过夜。
(5) PBS冲洗，5分钟×3次。
滴加适当比例稀释的生物素标记二抗(1%BSA-PBS 稀释)，37℃孵育10~30 分钟;或滴加第二代生物素标记二抗工作液，37℃或室温孵育10~30 分钟。
(6) PBS冲洗，5分钟×3次。
滴加适当比例稀释的辣根酶标记链霉卵白素(PBS 稀释)，37℃孵育10~30 分钟;或第二代辣根酶标记链霉卵白素工作液，37℃或室温孵育10~30 分钟。
(7) PBS 冲洗，5 分钟×3 次。
显色剂显色(DAB 或AEC)。自来水充分冲洗，复染，封片。
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