Crispr/Cas9介导基因敲入小鼠 (2015-06-02 13:48:13)
基因敲入小鼠--Crispr/Cas技术 原理 根据基因序列设计合成sgRNA,针对Knockin插入点或点突变位置构建含Knockin片段或点突变的同源序列,与Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵胞质,Cas9核酸酶、sgRNA、基因组靶序...
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
Crispr/Cas9介导基因条件敲除小鼠 (2015-06-02 13:45:06)
条件性基因敲除小鼠--Crispr/Cas技术 原理 根据基因序列设计合成两个sgRNA,分别针对两个Loxp的插入点,构建含Loxp的同源序列,与Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵胞质,Cas9核酸酶、sgRNA、基因组靶序列结合并...
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
Crispr/Cas9介导基因敲除小鼠 (2015-06-02 13:43:51)
基因敲除小鼠--Crispr/Cas技术 原理 根据基因序列设计合成sgRNA与Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵胞质,Cas9核酸酶、sgRNA、基因组靶序列结合并切割双链DNA,通过非同源性末端接合(NHEJ)修复途径造成靶基因的...
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
基因敲入小鼠 (2015-06-02 13:40:26)
原理 基因敲入(Knockin)是在目的基因位置引进特定的突变或外源基因,比如在目的基因引入点突变(模拟人类遗传疾病模型),或将报告基因(如EGFP、mRFP、mCherry、mYFP或LacZ等)或需要表达的功能性cDNA(如Cre、Dre...
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
条件基因敲除小鼠 (2015-06-02 13:38:28)
原理 条件性基因敲除主要是通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP、 FLP-Frt和Dre-Rox来实现的。其中最为常用的是Cre-LoxP系统,在待剔除的一段目的DNA序列的两端各放置一个LoxP序列,得到Flox(Flanked by lo...
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
基因敲除小鼠 (2015-06-02 13:36:57)
全基因敲除小鼠--ES细胞同源重组技术 原理 构建以筛选基因新霉素(Neo)取代敲除基因的一个或多个外显子的质粒,转入ES细胞,获得正确发生同源重组的ES克隆。ES细胞进行囊胚注射,获得部分ES来源的嵌合鼠,嵌合...
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
Rosa26定点插入转基因小鼠 (2015-06-02 13:31:01)
原理 Rosa26 基因已被证明在大部分组织和细胞中都有表达,而表达比较活跃的基因区域因为需要转录因子的进入基因组结构不会被异染色质化,因此在这个区域定点插入外源DNA,在各组织中表达的可能性都非常高。 I...
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
KO First多用途敲除小鼠模型 (2015-06-02 12:41:36)
原理 KO first (Conditional Ready)是一种多用途的模型,与条件敲除策略类似,在目的片段的两侧分别放置方向相同的LoxP位点,同时还在靶片段5’端内含子中放置一个两侧带有FRT位点的SA-IRES-reporter片段。...
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
基因修饰细胞系定制 (2015-06-02 12:37:40)
我们可提供以下三种技术服务,宿主细胞系可由客户提供,也可免费提供用于技术服务: 1) 基因敲除/敲入细胞系 2) 稳转细胞系 3) 细胞系RNAi
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
基因敲入大小鼠 (2014-09-23 10:25:27)
博舜联合(上海)实验中心长期从事基因敲除/敲入大、小鼠相关工作,团队成员在Nature Biotechnology、Nature Protocol、Nucleic Acids Research等国际知名杂志发表高水平文章,可通过Cas9技术进行基因嵌入大小鼠的...
博舜联合(上海)实验中心
[上海市闵行区]
转基因小鼠制备 (2014-05-05 14:51:37)
采用DNA受精卵雄原核注射或慢病毒介导的方法建立外源基因稳定整合的转基因小鼠。可根据需要导入蛋白表达基因、RNA基因(miRNA、siRNA)等。通过选择适当的启动子可实现导入基因的时空特异性表达。接受委托方提供...
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
小鼠胚胎操作及品系建立 (2014-05-05 14:46:35)
可进行小鼠胚胎的采集、冻存和冻存胚胎的复苏;可进行体外受精、胚胎生物净化、小鼠嵌合胚胎的制备和四倍体胚胎拯救。可提供小鼠饲养、繁殖、基因型鉴定及品系建立的技术服务。
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
普通基因敲除小鼠模型制备 (2014-05-05 14:45:21)
采用同源重组策略对小鼠基因组特定位点进行遗传修饰和目的片段的插入。可根据需要实现常规基因敲除或条件性基因敲除。对于基因敲除项目,委托方只需提供基因名称和Ensembl序列号;对于基因敲入项目接受委托方构建...
上海南方模式生物研究中心
[上海市浦东新区]
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