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实验攻略

血涂片染色方法及注意事项

2016年04月20日 浏览量: 评论(0) 来源:《兽医临床实验室检验手册》 作者:夏兆飞主译 责任编辑:wlladmin
摘要:血涂片风干后,须染色以清楚地鉴别细胞和异常细胞的特征。血涂片可应用任何一种罗曼诺夫斯基染色法,最常用的是瑞氏染色和瑞氏-姬姆萨染色。罗曼诺夫斯基染色法有一步法和三步法。染液的组分稍有不同,但通常包括伊红和亚甲蓝的固定液和缓冲液。固定液通常是95%甲醇。伊红成分可溶于酸性缓冲液中,使细胞的碱性成分

血涂片风干后,须染色以清楚地鉴别细胞和异常细胞的特征。血涂片可应用任何一种罗曼诺夫斯基染色法,最常用的是瑞氏染色和瑞氏-姬姆萨染色。罗曼诺夫斯基染色法有一步法和三步法。染液的组分稍有不同,但通常包括伊红和亚甲蓝的固定液和缓冲液。固定液通常是95%甲醇。伊红成分可溶于酸性缓冲液中,使细胞的碱性成分

着色,如血红蛋白和嗜酸性颗粒。亚甲蓝溶于碱性缓冲液中,使细胞的酸性成分着色,如白细胞核。Diff-Quik (Dade Behring,Deerfield,IL)是一步染色法,其染色结果尚可。当使用三步法染色时,这三种成分之间都要用去离子水漂洗。必须注意避免将水滴入任何一种染液组分,否则染色液会退化。染色后漂洗,显微镜检查前须风干玻片。

表2-3列出了与染色相关的问题。染色过度会造成细胞颜色偏深,漂洗过度则造成着色不良。定期更换染液对保证染色结果稳定是必须的,还可防止染液渣沉淀在涂片上。染液可通过过滤除去多余的残渣。红细胞的折光伪象也是常见的问题,通常是固定液潮湿引起的。注意不要把这些伪象和细胞异常相混淆。

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