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实验方法

狨猴实验操作基础要领

2016年03月04日 浏览量: 评论(0) 来源:深圳先进技术研究院 作者:陈良 责任编辑:admin
摘要:狨猴相对于我国大多数实验研究人员来讲是陌生的,其实在国外,特别是日本已成功培育出转基因狨猴。在我国从上世纪80年代开始有科研人员从事狨猴的的实验化,但是基于狨猴本身特点和我们的技术资源匮乏,未曾广泛推广,而应用于生命科学、生物医学等领域,仅以本文供各实验人员应用参考。

一、称重

一般使用量为2.5—3.5kg/敏感度为5g的天平或台秤。事项准备好动物体重测定箱。大小一般为                     (30*18*20cm),网眼1cm左右,能耐高温消毒或腐蚀),将空单笼去皮,然后狨猴放入但笼内,读数并登记即可。

二、采血
1、股动/静脉采血

使用5*-6*注射针,可从股静脉采得2-5ml静脉血。注意避免损伤股动脉。可按如下步骤进行:①助手采用固定法固定狨猴,采血人用左手拉住备采血脚,助手拉好另一只脚,并把两腿分开成人字形。②在腹股沟、股三角处触摸股动脉,在股动脉内侧处进行股静脉穿刺采血。③采血后用无菌啥不在出血处压迫 1-2分钟止血,以免引起血肿或继续流血。每次采血必须小于2ml,采血后应注意补铁,维生素B12和  维生素K。采血间隔最好15天。

2.尾静脉采血

用灭菌的三菱针刺破尾静脉最多可取得0.5ml静脉血。

三、给药

1.口服

一般药物可拌在动物喜爱的食物中,或饮水中服用。也可用直径1.5mm的胃管给药,插入深度为8cm左右,具体操作如下:

以一根直径为4-5mm的软木或者塑料管横放在动物口中,让狨猴咬住以保持张口。

用手术钳轻夹着直径为1.5mm左右的胃管从软木或塑料的上方,轻而缓的插入约8cm深度。

将导管外口放入生理盐水总,视有无气泡外溢并且回抽有阻力或少许胃液,从而证明有无正确插入到胃,如果失败,应缓慢拔出,重新插入。

在导管外口街上注射器,缓慢的注入药物。

2.注射

 皮下注射:通常在狨猴的背部进行,每次为0.5-1ml.如果注射量大,则可分几处注射。

肌肉注射:在大腿外侧进行,剂量与小鼠一样。

静脉注射:在小隐静脉或股静脉进行注射。

腹腔内注射:在腹部右侧下方进行注射时,须注意略靠外侧,以免损伤膀胱。注射针头斜刺入皮下,然后要垂直刺入腹腔,回抽针头是否刺入脏器或血管,然后才开始将药物注入腹腔。

四、 麻醉

全身麻醉一般为盐酸氯胺酮进行肌肉注射,注射12-15mg/kg体重的剂量后,一般可以保持20-30分钟的安静状态;胸式呼吸和腹式都存在,肌肉松弛不显著,瞳孔大小相当于麻醉前或较麻醉前略微缩小, 对光反射依然存在。注射剂量为20-35mg/kg体重,麻醉可持续为1小时左右,此时,胸式呼吸减弱,腹式呼吸加剧,肌肉松弛,瞳孔轻度扩大。经多次麻醉后,麻醉的时间会逐渐缩短。

注意:麻醉时会出现体温下降。室温下(25摄氏度)肌肉注射盐酸氯胺酮猴,15分钟内体温下降2摄氏度以上。尚若收入后没有保暖装置,并且温度维持33摄氏度,那么麻醉猴的体温便或弧度不超过1摄氏度。

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