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实验方法

精液的品质检查(三)

2015年03月02日 浏览量: 评论(0) 来源:《实验动物管理与实用技术手册》 作者:徐国景 易工城 唐利军 孔利佳 责任编辑:lmjinfo

( 五 ) 死活精子百分率

将取样的精液进行染色后,在显微镜下计数死活精子所占的百分率,是评定精子质量的又一重要指标。其理论依据,主要是精子死后,头部易着色,活精子染色后则不易着色,这是因为死亡精子的膜(后帽)递过性增强所以易着色,而活的相反,一般用苯胺黑、蓝作背景,然后用其他染料染色。

方法:先滴10% 苯胺黑(37℃)在载玻片上,再滴 5% 伊红在苯胺黑旁边 , 将精液滴到伊红中,用玻棒搅匀,再和苯胺黑混合,作涂片检查。计算死活精子的百分比。

( 六 ) 精子密度

精子密度也称精子浓度(sperm concentration),指每毫升精液中所含的精子数。精子密度的大小直接关系到精液的稀释倍数和输精剂量的有效精子数,也是评定精液品质的重要指标之一。评定的方法一般有目测法、计数法和光电比色法。

1. 目测法

与检查活率的方法相同,只是精液不做稀释。按照精子密度大小粗略分为密、中、稀三个等级。

密:视野中充满精子,间隙小于1个精子,精子数约为5亿/ml;

中:空隙明显,间隙等于1个精子,精子数约为2~4 亿/ml;

稀:数量少,其间隙超过1个精子,精子数约为2 亿以下:8 千万 ~2 亿。

如下图所示。

这一方法受检查者的主观因素影响,误差较大。但对于直观的估价 , 方法简便,尤其适用于人工授精现场的观察,有一定的参考意义。

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